酶聯免疫試劑盒（Elisa）是一種敏感性高，特異性強，重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩定，易保存，操作簡便，結果判斷較客觀等因素，目前已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。
試劑盒操作看似簡便，但要做到十分卻也是個技術活。它對實驗室操作的環境以及操作人員的操作的熟練程度有著較高的要求。由于大部分的試驗操作步驟都是由實驗人員來完成的，人為的誤差相對嚴重一些。再此本人結合了自己的工作實踐向大家分享一下酶聯免疫試劑盒操作時的注意事項。
?實驗室的環境要干凈，防止空氣中的一些細菌或粉塵對實驗造成干擾。?一般的酶聯免疫試劑盒中的酶標抗體是以辣根過氧化物酶（HRP）進行標記
的。因此要求樣本不能含疊氮鈉（NaN3），因為NaN3是HRP的抑制劑。?如果樣本是血清，應該充分離心，不得有顆粒。
?試劑盒應在保質期內使用。不同批次的試劑盒中的溶液不得混用。?在進行酶聯免疫實驗之前，應該將試劑盒放置室溫平衡30min以上。?稀釋溶液時，應按照說明書的要求進行稀釋。盡量選用去離子水或雙蒸
水進行稀釋。
?要正確使用移液器，吸取液體要，槍頭上不得留有氣泡。吸取不同的液
體時，要注意更換槍頭。
?加樣時要懸臂加樣，避免槍頭和孔內液體接觸。
?建議所有的樣本和空白對照都做雙份檢測，取平均值，以減小實驗誤差。?孵育時需將微孔用封板膜或保鮮膜封好，防止水分的蒸發。且封板膜不得重
復使用。
洗板時，要注意防止孔間的交叉污染。
?由于底物顯色劑對光較敏感，因此進行顯色時，應注意避光。
?底物顯色劑為TMB，應避免與皮膚接觸。終止液為2M濃硫酸，具有腐蝕
性，應避免與皮膚接觸。
?酶標儀使用前，應先預熱30min。讀取結果前，輕輕震蕩，使溶液均一。讀
數據時應擦干酶標板底部，且孔內不能有氣泡。
?酶標包被板開封后如未用完，應立即裝入密封袋中加干燥劑保存。