美日韩精品-日本边添边摸边做边爱喷水-日本老熟妇毛茸茸-五月婷婷在线观看视频-91精品在线播放-久久精品中文字幕-成 人 黄 色 片 在线播放-窝窝午夜看片成人精品-av在线麻豆-天天久久-夜夜狂射影院欧美极品-精品久久久久久无码人妻-久久免费一级片-欧美色图17p-亚洲女同成av人片在线观看-久久亚洲中文字幕无码-日本精品视频一区二区-日韩少妇乱码一区二区三区免费-日本真人做爰免费的视频-野狼第一精品社区

您好,歡迎進入研域(上海)化學試劑有限公司網站!
本站熱搜:科研細胞 | 生化試劑 | 食品農殘檢測 | 動物ELISA試劑盒 | IL-4 | IL-6 | VEGF | TNF-A
  • 技術文章ARTICLE

    您當前的位置:首頁 > 技術文章 > ELISA試劑盒定性檢測

    ELISA試劑盒定性檢測

    發布時間: 2014-07-01  點擊次數: 2716次

    ELISA試劑盒的結果判定分為定性和定量兩種 ,在間接法和夾心法ELSIA中,陽性孔呈色深于陰性孔。在競爭法ELISA中則相反,陰性孔呈色深于陽性孔。那么兩類結果如何判斷呢?南京森貝伽生物技術為您解析: 
    (1)間接法和夾心法
    這類反應的定性結果可以用肉眼判斷。目視標本也無色或近于無色者判為陰性,顯色清晰者為陽性。但在ELSIA中,正常人血清反應后常可出現呈色的本底,此本底的深淺因試劑的組成和實驗的條件不同而異,因此實驗中必須加測陰性對照。陰性對照的組成應為不含受檢物的正常血清或類似物。在用肉眼判斷結果時,更宜用顯色深于陰性對照作為標本陽性的指標。
    目視法簡捷明了,但頗具主觀性。在條件許可下,應該用比色計測定吸光值,這樣可以得到客觀的數據。先讀出標本(sample,S)、陽性對照(P)、和陰性對照(N)的吸光值,然后進行計算。計算方法有多種,大致可分為陽性判定值法和標本與陰性對照比值法兩類。
    a.陽性判定值 
    陽性判定值(cut-off value)一般為陰性對照A值加上一個特定的常數,以此作為判斷結果陽性或陰性的標準。
    用此法判斷結果要求實驗條件十分恒定,試劑的制備必須標準化,陽性和陰性的對照品應符合一定的規格,須配用精密的儀器,并嚴格按規定操作。陽性判定值公式中的常數是在這特定的系統中通過對大量標本的實驗檢測而得到的。現舉某種檢測HBsAg的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對照品為不含HBsAg的復鈣人血漿,陽性對照品HBsAg的含量標明為P=9±2ng/ml。每次試驗設2個陽性對照和3個陰性對照。測得A值后,先計算陰性對照A值的平均數(NCX)和陽性對照A值的平均數(PCX),兩個平均數的差(P-N)必須大于一個特定的數值(例0.400),試驗才有效。3個陰性對照A值均應≥0.5×NCX,并≤1.5×NCX,如其中之一超出此范圍,則棄去,而已另兩個陰性對照重新計算NCX;如有兩個陰性對照A值超出以上范圍,則該次實驗無效。陽性判定值按下式計算:陽性判定值=NCX+0.05,標本A值>陽性判定值的為陽性,小于陽性判定值的為陰性。應注意的是,式中0.05為該試劑盒的常數,只適合于該特定條件下,而不是對各種試劑均可通用。
    根據以上敘述可以看出,在這種方法中陰性對照和陽性對照也起到試驗的質控作用,試劑變質和操作不當均會產生"試驗無效"的后果。
    b.標本/陰性對照比值 
    在實驗條件(包括試劑)較難保證恒定的情況下,這種判斷法較為合適。在得出標本(S)和陰性對照(N)的A值后,計算S/N值。也有寫作P/N的,這里的P不代表陽性(positive),而是病人(patient)的縮寫,不應誤解。為避免混淆,更宜用S/N表示。在早期的間接法ELISA中,有些作者定出S/N為陽性標準,現多為各種測定所沿用。實際上每一測定系統應該用實驗求出各自的S/N的閾值。更應注意的是,N所代表的陰性對照是不含受檢物質的人血清。有的試劑盒中所設陰性對照為不含蛋白質或蛋白質含量較底的緩沖液,以致反應后產生的本底可能較正常人血清的本底低得多。因此,這類試劑盒規,如N<0.05(或其他數值),則按0.05計算,否則將出現假陽性結果。
    (2)競爭法
    在競爭法ELISA中,陰性孔呈色深于陽性孔。陰性呈色的強度取決于反應中酶結合物的濃度和加入競爭抑制物的量,一般調節陰性對照的吸光度在1.0-1.5之間,此時反應zui為敏感。
    競爭法ELISA不易用自視判斷結果,因肉眼很難辨別弱陽性反應與陰性對照的顯色差異,一般均用比色計測定,讀出S、P和N的吸光值。計算方法主要也有兩種,即陽性判定值法和抑制率法。
    ELISA試劑盒
    a. 陽性判定值法
    與間接法和夾心法中的陽性判定值法基本相同,但在計算公式中引入陽性對照A值,現舉某種檢測抗HBc的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對照為不含抗HBc的復鈣人血漿,陽性對照中抗HBc含量為125±100u/ml。每次試驗設2個陽性對照和3個陰性對照。測得A值后,先計算陰性對照A值的平均值(NCX)和陽性對照A值的平均數(PCX),兩個平均數的差(N-P)必須大于一個特定的數值(例如0.300),試驗才有效。3個陰性對照A值均應小于2.000,而且應≥0.5×NCX并≤1.5×NCX,如其中之一超出此范圍,則棄去,而以另2個陰性對照重新計算×NCX;如有2個陰性對照A超出以上范圍,則該次實驗無效。陽性判定值按下式計算:陰性判定值=0.4×NCX+0.6×PCX,標本A值≤陽性判定值的反應為陽性,A>陽性判定值的反應為陰性。 
    b. 抑制率法 
    抑制率表示標本在競爭結合中標本對陰性反應顯色的抑制程度,按下式計算:
    抑制率(%)= (陰性對照A值-標本A值)×100%/陰性對照A值,一般規定抑制率≥50%為陽性,<50%為陰性。

產品中心 Products
在線客服 聯系方式

服務熱線

021-54479081
021-54461587

主站蜘蛛池模板: 国产精品1区2区3区在线观看 | 一区二区三区在线播放 | 成年人精品 | 高清免费在线视频 | 六月丁香激情网 | av色综合网 | 亚洲精品无| 久久看视频 | 久久久午夜精品福利内容 | 中文字幕 成人 | 狠狠的日 | 日韩精品中文字幕在线播放 | 六月婷婷久香在线视频 | 久久tv | 丝袜美女视频网站 | 99爱视频 | 久操久 | 国产精品视频区 | 91九色国产在线 | 香蕉网站在线观看 | 一区二区三区免费 | av免费看在线 | 亚洲成av人片在线观看www | 中文字幕刺激在线 | 欧美日韩1区2区 | 国产精品毛片一区视频播不卡 | 国产成人在线播放 | 99热在线这里只有精品 | 国产精品一区二区三区免费看 | 国产精品一区专区欧美日韩 | 国产剧情一区二区在线观看 | 国产精品亚洲成人 | 狠狠色噜噜狠狠 | 久香蕉| 精品一区三区 | 99热精品在线观看 | 夜夜躁日日躁狠狠久久av | 精品 激情 | 国产九色在线播放九色 | 在线观看视频免费播放 | 91精品在线播放 | 国产中文欧美日韩在线 | 天天干亚洲 | 国产资源在线播放 | 亚洲国产精彩中文乱码av | 久久国产精品99久久久久久进口 | 伊人色综合久久天天 | 最近免费中文字幕mv在线视频3 | 91三级视频| 久久国产片 | 天天干夜夜爱 | 免费看片网址 | av 一区二区三区 | 91看片在线播放 | 高清国产在线一区 | 在线免费观看视频一区 | 人人舔人人爽 | 色姑娘综合网 | 日本不卡123区 | 99在线精品视频观看 | 手机在线永久免费观看av片 | 香蕉在线视频观看 | 91亚洲精品久久久久图片蜜桃 | 国产欧美高清 | 久久久久亚洲a | 波多野结衣精品 | 国产精品入口a级 | 久久66热这里只有精品 | 日韩av电影免费在线观看 | 久久久久色 | 99麻豆久久久国产精品免费 | av中文字幕网址 | 国产又黄又硬又爽 | 欧美99热 | 午夜国产在线 | 日韩免费在线播放 | 97国产精品一区二区 | 欧美一级日韩三级 | 欧美怡红院 | 久久伊人精品天天 | 午夜色大片在线观看 | 国产91精品在线播放 | 伊人av综合| 四虎成人精品永久免费av | www.亚洲黄| 欧美久久电影 | 激情久久网| 91天堂影院 | 成年人电影免费看 | 久久麻豆视频 | 亚洲精品国产精品久久99 | 国产精品初高中精品久久 | 国产专区免费 | 在线免费观看黄色av | 久久精品2 | 日韩高清在线一区二区 | 欧美日韩一级在线 | 99热99re6国产在线播放 | 亚洲视频在线免费观看 |